3、运载体需要具备哪些条件？

【知新】

1、目的基因的获取（想一想，为什么要有这一步？）

　　思考并回答：

　　 （1）目的基因的获取方法有哪些？

　　 （2）为什么要建立基因文库？怎么建立的？

　　 （3）如何从基因文库中获取目的基因？

　　 （4）为什么要建立cDNA文库？如何获取cDNA？

（5）PCR技术的原理是什么？

（6）如何获取引物？

（7）PCR技术扩增的过程是？

　　2、 基因表达载体的构建

　　思考并回答：

　　 （1）为什么要构建基因表达载体？单独的DNA片段能不能稳定遗传？

（2）基因表达载体的构成包括哪些元件？

（绘制基因表达载体的模式图）

（3）什么是启动子、终止子？他们位于哪里？有什么作用？

（4）为什么要有标记基因？它的作用是？

　　3、 将目的基因导入受体细胞

（想一想，为什么要导入受体细胞？在外界能不能维持稳定和表达？）

思考并回答：

（1）什么是转化？

（2）将目的基因导入植物细胞的方法有哪些？最常用的方法是？哪些细胞可以作为受体细胞？（结合示意图，了解农杆菌转化法的基本过程）

（3）将目的基因导入动物细胞的基本操作程序是？要用到什么技术？哪些细胞可以作为受体细胞？

（4）早期的基因工程为什么选择原核生物作为受体细胞？

（5）大肠杆菌细胞最常用的转化方法是？

　　4、 目的基因的检测与鉴定（为什么要检测和鉴定？）

思考并回答：

（1）目的基因的检测与鉴定可以从什么水平来做？

（2）核酸杂交技术基本过程是？ 什么是探针？

（3）如何检测目的基因是否翻译出蛋白质？

（4）如何从个体生物学水平鉴定转基因抗虫棉？

三、 反思总结

基因工程的基本操作步骤 主要方法、技术或组成 步骤一： 步骤二： 步骤三： 导入植物细胞： 导入动物细胞： 导入微生物细胞： 步骤四： 四、当堂检测

1、基因工程的操作步骤：