【出示目标】
1. 尝试用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质。
2. 推断组织样液中有机物的种类及相对含量。
3. 通过探究实验和探究后小组的交流活动,培养学生的初步探究能力和表达交流能力。
【新课】
我们在化学中学习过物质的鉴定,其原理是被鉴定的物质与所用的化学试剂要么发生颜色反应,要么产生沉淀,我们生物学上也采用此原理,在生物学中物质鉴定的理念是:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
今天,我们学习鉴定生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的基本方法。
(一)还原糖的鉴定
1. 原理:
可溶性还原糖+ 斐林试剂→砖红色沉淀。
2. 操作过程:
3. 实验注意事项:
(二)脂肪的鉴定
1. 原理:
脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒。
2. 操作过程:
3. 实验注意事项:
①.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好(实验前浸泡3h~4h)。
②该试验成功的关键是获得只含有单层细胞理想薄片。
③滴苏丹Ⅲ染液染液染色2-3min,时间不宜过长,以防细胞的其他部分被染色。
(三)蛋白质的鉴定
1.原理:
蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应。
2. 操作过程:
3. 实验注意事项:
演示四类有机物的显色反应
引导学生对要检测的样品作出假设
提醒学生分工合作。
小结:本节课我们练习了生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的鉴定,大家要重点掌握实验的原理,材料的选择及实验的过程。在以后的学习中能够应用本实验的方法进行简单的物质鉴定。
【布置作业】
1. 完成实验报告。
2. 总结斐林试剂与双缩脲试剂的异同点。
3. 设计实验鉴定唾液中是否含有蛋白质,写出简要的实验步骤。
明确本节课的学习目标
学生自主学习教材相关内容。
思考:
1. 实验的原理是什么?
2. 实验的材料选择有哪些要求?
3. 实验的操作过程有哪些注意事项?
选材
制备组织样液
注入组织样液2ml
加斐林试剂:2ml(由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成,不能分别加入)
水浴加热:煮沸2min
观察溶液颜色变化:
①还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织,以苹果、梨为最好。
②斐林试剂要两液混合均匀且现配现用。
取材
滴苏丹Ⅲ染液
去浮色
制成临时装片
观察
①蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d~2d的黄豆种子(或用豆浆、或用鸡蛋蛋白稀释液)。
②双缩脲试剂的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液),再加入双缩脲试剂B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液)。
③还可设计一只加底物的试管,不加双缩脲试剂,进行空白对照,说明颜色反应的引起是蛋白质的存在与双缩脲试剂发生反应,而不是空气的氧化引起。
学生回忆演示实验,结合实物设计实验的步骤。
学生自选材料分组实验并设计表格记录实验结果。
学生小组交流实验结果
并交流讨论实验中遇到的问题。
参考资料
还原糖的鉴定 生物组织中普遍存在的还原糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。它们的分子内都含有还原性基团(游离醛基或游离酮基),因此叫做还原糖。蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基,因此叫做非还原性糖,不具有还原性。本实验中,用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否,而不能鉴定非还原性糖。
斐林试剂由质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05 g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。其反应式如下:
CH2OH-(CHOH)4-CHO+2Cu(OH)2→CH2OH-(CHOH)4-COOH+Cu2O↓+2H2O
用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液的颜色变化过程为:蓝色棕色砖红色(沉淀)。
用于鉴定还原糖的实验材料准备植物组织是常用的实验材料,但必须加以选择。在双子叶植物中,光合作用的主要产物葡萄糖形成后,合成为淀粉,暂时储藏在叶子内,因此最好不用双子叶植物的叶子作实验材料。有些单子叶植物,如韭菜、鸢尾,并不将光合作用的初始产物转变为淀粉,因此叶内含有大量的可溶性单糖,但是,由于叶片中叶绿素的颜色较深,对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用,导致实验现象不明显,因此,也不宜用单子叶植物的叶子作实验材料。
本实验最理想的实验材料是还原糖含量较高的植物组织(或器官),而且组织的颜色较浅或近于白色的,如苹果和梨的果实。经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。
蛋白质的鉴定 鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01 g/mL的硫酸铜溶液。在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应