同时使用 分化频率提高
生长素/细胞分裂素比值与结果 比值高时 促进根的分化,抑制芽的形成 比值低时 促进芽分化,抑制根形成 比值适中 促进愈伤组织生长 (3)环境因素:pH、温度、光等环境条件也能影响植物组织培养。
三、实验操作过程
1.制备MS固体培养基
(1)配制各种母液:将各种成分按配方比例配制成的浓缩液。使用时根据母液的浓缩倍数,计算用量,并加蒸馏水稀释。
(2)配制培养基:应加入的物质有琼脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液,并用蒸馏水定容到1 000 毫升。在菊花组织培养中,可以不添加植物激素,原因是菊花茎段组织培养比较容易。
(3)灭菌:采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。
2.外植体消毒
轻松判断(1)在此消毒过程中,强度越大越好。( )
(2)植物组织培养中无菌技术是操作成功的关键,针对培养基和外植体应进行灭菌操作。( )
提示:(1)× 对外植体进行表面消毒时,既要考虑到药剂的消毒效果,又要考虑到植物的耐受力。
(2)× 对培养基应进行高压蒸汽灭菌,对外植体应先后使用体积分数为70%的酒精及质量分数为0.1%的氯化汞予以消毒。
3.接种:用体积分数为70%的酒精消毒工作台,点燃酒精灯。注意所有接种工作都必须在酒精灯火焰旁进行,器械使用前后都要用火焰灼烧灭菌。接种过程中插入外植体时形态学上端朝上,每个锥形瓶接种6~8个外植体。
4.培养:放在无菌箱中进行,并定期进行消毒,保持适宜的温度和光照。