核心要点(一) 对"提取和分离叶绿体中的光合色素"实验分析
1.原理剖析
(1)提取色素:叶绿体中的各种光合色素能够溶解在无水乙醇、丙酮等有机溶剂中。
(2)分离色素:叶绿体中的色素都能溶解在层析液中,在层析液中的溶解度不同;溶解度大的色素分子随层析液在滤纸上扩散快,反之则慢,所以不同色素可以在滤纸上因扩散速度不同而分开,各种色素在滤纸上形成不同的色素带。
2.试剂及对实验结果的分析
试剂 作用 缺少或替换的实验结果 无水乙醇 溶解光合色素 用水替换,提取不到光合色素 碳酸钙 保护叶绿素 缺少,叶绿素被破坏,滤纸条上不会出现蓝绿色或黄绿色的色素带,或色素带窄 二氧化硅 研磨充分 缺少二氧化硅,色素带窄或不出现 层析液 使色素随层析液在滤纸条上扩散开来,使色素分离 3.实验成功的关键点分析
成功的关键点 理由 叶片新鲜、墨绿色 保证色素的含量 研磨迅速、充分 叶绿素不稳定,易被破坏,保证提取到较多的叶绿素;减少无水乙醇的挥发量 收集滤液后,及时用棉塞塞紧试管口 防止无水乙醇的挥发 制备滤纸条剪去两角 减少边缘效应,使色素在滤纸上扩散均匀 滤液细线要细、直、齐、重复 细、直、齐:色素带分离清晰;重复:增加色素的含量,增大色素带的宽度 滤液细线不能触及层析液 触及层析液会使色素溶解在层析液中,导致滤纸条上无清晰色素带
[名师点拨] 防止无水乙醇和层析液过度挥发的措施
(1)迅速研磨。
(2)滤液收集完毕后,及时用棉塞塞紧试管口。
(3)层析时用培养皿覆盖烧杯。