1.下列有关凝胶色谱法原理的叙述,不正确的是( )
A.是利用凝胶把相对分子质量不同的蛋白质分离开的一种方法
B.在洗脱过程中,相对分子质量大的蛋白质不能进入凝胶内部而最先流出
C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其孔隙大小与被分离的蛋白质的大小无相应关系
D.凝胶对要分离的物质没有吸附作用,所有要分离的物质最终都能被洗脱出来
答案 C
解析 凝胶实际上是一些微小的多孔球体,小球体内部有许多贯穿的通道,孔隙的大小决定蛋白质能否进入凝胶内部的通道,C错误。
2.(2019·四川成都测试)如图表示对某蛋白质溶液进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果,下列相关叙述不正确的是( )
A.蛋白质上某些基团解离后可使蛋白质带电荷,电场中带电荷的蛋白质分子会向着与其所带电荷相反的电极移动
B.蛋白质在SDS-聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小
C.蛋白质在SDS-聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度完全取决于其分子的大小
D.电泳结果表明溶液中蛋白质可能有两种,但也可能只有一种
答案 B
解析 蛋白质的氨基与羧基可发生解离,使其带正电荷或负电荷,在电场的作用下发生移动,A正确;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳所加的SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移速度完全取决于分子的大小,B错误、C正确;由几条肽链组成的蛋白质复合体在SDS的作用下会解聚成单条肽链,因此测定的结果只是单条肽链的分子量,故根据如图所示结果不能判断溶液中有几种蛋白质,D正确。
二、实验操作和操作提示
1.样品处理
(1)红细胞的洗涤
①目的:去除杂蛋白。
②方法:低速短时间离心。