(2)使目的基因能够表达和发挥作用。
2.基因表达载体的组成
基因表达载体的组成
两子启动和终止;目的基因在中间;标记基因来筛选。
3.基因表达载体的功能:通过基因表达载体将目的基因导入受体细胞。
三、将目的基因导入受体细胞(阅读教材P11~P13)
.转化的概念:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
.将目的基因导入植物细胞
(1)农杆菌转化法:将目的基因导入双子叶植物和裸子植物。
(2)基因枪法:将目的基因导入单子叶植物常用的方法。
(3)花粉管通道法:我国科学家独创的一种方法。
将目的基因导入动物细胞
(1)方法:显微注射法。
(2)常用受体细胞:受精卵。
4.将目的基因导入微生物细胞
(1)方法
①用Ca2+处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为感受态细胞)。
②感受态细胞吸收重组表达载体DNA分子。
(2)受体细胞:原核细胞(使用最广泛的是大肠杆菌细胞)。
(3)原核生物的特点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。
四、目的基因的检测与鉴定(阅读教材P13~P15)
分子水平检测
(1)检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因。
方法:DNA分子杂交技术。
(2)检测目的基因是否转录出mRNA。
方法:分子杂交技术。