2.电泳
(1)从电荷方面思考,适合电泳法分离的各种分子需具备什么条件?
答案 各种分子应带有不同种类和不同量的电荷。
(2)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质是否依据蛋白质所带电荷的差异?为什么?
答案 否。因为SDS能与蛋白质结合,形成蛋白质-SDS复合物,SDS它所带负电荷的量远大于蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差异,使电泳迁移率完全由蛋白质分子的大小决定。
归纳总结 琼脂糖凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的两点区别
(1)分离原理不同
①琼脂糖凝胶电泳依据分子所带电荷的差异和分子大小、形状等。
②SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳则完全取决于分子大小,而非电荷性质和分子形状。
(2)用途不同
①琼脂糖凝胶电泳广泛应用于核酸的研究中,用于分离大分子核酸。
②SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳则广泛应用于分离蛋白质和相对分子质量较小的核酸。
1.凝胶色谱法分离蛋白质时由色谱柱下端最先流出的是( )
A.相对分子质量较小的蛋白质
B.相对分子质量较大的蛋白质
C.凝胶颗粒
D.葡萄糖或琼脂糖分子
答案 B
解析 凝胶色谱法分离蛋白质的原理是依据蛋白质分子相对分子质量的大小,相对分子质量大的分子不能进入凝胶内部的通道,路程较短,移动速度快,先洗脱出来;相对分子质量小的分子能够进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度慢,后洗脱出来,因此最先流出的应是相对分子质量较大的蛋白质,而凝胶颗粒是不能流出的。
2.有关凝胶色谱法和电泳法的说法,正确的是( )
A.它们都是分离蛋白质的重要方法
B.它们的原理相同
C.使用凝胶色谱法需要使用缓冲溶液而电泳不需要
D.以上说法都正确