低于50 ℃时若不及时操作，琼脂会凝固。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。

(2)分析下图，回答①、②问题：

①为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？

答案　通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

②从防止杂菌污染的角度思考，平板冷凝后将平板倒置的原因是什么？

答案　平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。

(3)怎样判断制备的培养基是否合格、成功，是否受到污染？

答案　未接种的培养基在恒温箱中保温一段时间后，如果无菌落生长，说明培养基制备成功、合格，未受到污染。

1.某学校开展大肠杆菌培养活动，首先对实验室进行清扫和消毒处理，然后准备各种原料和用具。请回答下列问题：

(1)对买回来的菌种进行扩大培养，首先制备试管培养基，写出制备牛肉膏蛋白胨固体培养基所需的原料：______________________________________________________________。

(2)微生物在生长过程中对各种成分需求量不同，配制培养基时各成分要有合适的________。在烧杯中加入琼脂后要不停________，防止______________________。

(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干支试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入____________中灭菌。灭菌完毕后拔掉电源，待压力表的压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应____________。

答案　(1)牛肉膏、蛋白胨、蒸馏水、NaCl、琼脂

(2)比例　搅拌　琼脂糊底引起烧杯破裂

(3)高压蒸汽灭菌锅　废弃

2.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的具体描述正确的是(　　)

①待培养基冷却至40 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板　②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞　③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰　④用左手的拇指和食指完全打开皿盖　⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖　⑥等待平板冷却5～10 s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上

A.①③④⑤ B.④⑤⑥　C.③⑤ D.①②④⑥