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自主思考 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难?
提示:花瓣松动后,微生物就可能侵入花药,给材料的消毒带来困难。
3.接种和培养
(1)剥取花药:消毒后的花蕾,要在无菌条件下除去花萼、花瓣。剥取花药时,一是注意不要损伤花药,原因是容易从受伤部位产生愈伤组织;二是要彻底除去花丝,原因是花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成。
(2)接种花药:剥取的花药要立即接种到培养基上。每个培养瓶接种7~10个花药。
自主思考 剥取的花药为什么要立即接种到培养基上?
提示:防止空气中的杂菌污染花药。
(3)培养:温度为25 ℃,幼苗形成之前不需要光照。培养20~30 d后,花药开裂,长出愈伤组织或释放出胚状体。前者还要转移到分化培养基上进行分化培养成再生植株;后者要尽快分开并转移到新的培养基上。
(4)鉴定和筛选:通过愈伤组织形成的植株,常常会出现染色体倍性的变化,因而需要鉴定和筛选。