2.目的基因的获取

(1)目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用的因子。

(2)常见方法

①从基因文库中获取

基因文库的种类

②利用PCR技术扩增目的基因

a.原理：DNA双链复制。

b.条件：引物、DNA模板、Taq酶、四种脱氧核苷酸。

c.过程：目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。

d.结果：每一次循环后，目的基因的量可以增加一倍，即成指数形式扩增(约为2n，n为扩增循环的次数)。

③人工合成法：如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可借助DNA合成仪用化学方法直接人工合成。

合作探究

1.从基因文库中获取目的基因

(1)cDNA文库是从某种生物的某一细胞中提取出mRNA，经反转录过程获得的基因文库，为什么该基因文库仅含有该生物的部分基因？

答案　由于基因的选择性表达，某种生物的某一细胞中仅有部分基因转录出mRNA，所以由该细胞中的mRNA反转录得到的基因文库仅含该生物的部分基因。

(2)结合基因组文库、cDNA文库的概念，尝试从范围上比较二者之间的大小关系，并阐明理由。

答案　基因组文库＞cDNA文库。基因组文库含有某种生物的全部基因，而cDNA文库只含有某种生物的部分基因，二者都属于基因文库。

2.PCR过程中需要解旋酶吗？所需要的DNA聚合酶应具有什么特点？

答案　PCR过程中，DNA双链解开是在高温下完成的，不需要解旋酶；由于PCR过程温度较高，所以需要能耐高温的DNA聚合酶。

3.人工合成目的基因时，需要预先知道目的基因的核苷酸序列。请推测目的基因的核苷酸序列是如何得到的？

答案　测定目的基因产物的氨基酸序列，根据密码子表推测mRNA的可能的核糖核苷酸序列，再根据碱基互补配对原则推测出目的基因的脱氧核苷酸序列。