圆形红色区域愈大,表明这种菌利用尿素的能力愈强。
2.培养基的配制与灭菌
全营养LB固体培养基 尿素固体培养基 培养基组成 0.25 g蛋白胨,0.12 g酵母提取物,0.25 g NaCl,0.5 g琼脂糖,25 mL 水 0.025 g 葡萄糖,0.12 g NaCl,0.12 g K2HPO4,0.25 mg 酚红,0.5 g 琼脂糖,15 mL 水,10 mL 尿素溶液 灭菌
方法 高压蒸汽灭菌 10 mL尿素溶液采用G6玻璃砂漏斗过滤灭菌,其余用高压蒸汽灭菌,60 ℃时两者混合
上述是选择培养基的是尿素固体培养基。用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基的原因是:琼脂中含有少量含氮化合物,用琼脂糖代替琼脂作为微生物培养基的固化剂,是为了尽可能使培养基中只含尿素一种含氮化合物,以防止琼脂中的含氮化合物被不能以尿素为氮源的细菌利用,有利于对以尿素为氮源的细菌的筛选。
思维拓展 常见选择培养基的用途不同
(1)加高浓度食盐:用于筛选获得金黄色葡萄球菌。
(2)加青霉素:用于筛选获得真菌(酵母菌和霉菌),原理是青霉素能破坏原核生物的细胞壁,杀死原核生物。
(3)缺少氮源的培养基:用于筛选得到自生固氮菌。
(4)缺少碳源的培养基:筛选自养型微生物。
3.分离原理
尿素固体培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素为氮源;缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能正常生长繁殖,所以,用尿素固体培养基能够筛选出分解尿素的微生物。
例1 下列有关叙述,不正确的是( )
A.脲是一种有机化合物,含有氮元素
B.地表土壤中含有一定量的脲
C.以尿素为氮源的细菌含有脲酶
D.在尿素固体培养基上培养含有脲酶的微生物会导致培养基呈酸性
答案 D
解析 根据反应式:(NH2)2C=O+H2O\s\up7(脲酶(脲酶)2NH3+CO2,在尿素固体培养基上培养含有脲酶的微生物会产生NH3,从而导致培养基呈碱性。