稳定的缓冲溶液 提供类似细胞内DNA复制的液体环境 PCR仪 控制温度 　　2.PCR的反应过程

　　PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。在循环之前，常要进行一次预变性，以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。

　　(1)变性：当温度上升到90 ℃以上时，双链DNA解聚为单链。

　　(2)复性

　　温度下降到50 ℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。

　　(3)延伸

　　温度上升到72 ℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸(A，T，C，G)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。

　　3．反应结果

　　从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数形式扩增。

　　[总结升华]

　　1．生物体内DNA复制与PCR反应的比较

比较项目 体内DNA复制 PCR反应 解旋 在解旋酶作用下，细胞提供能量，部分DNA双链解开 80～100 ℃高温解旋，DNA双链全部解开，不需要解旋酶 酶 解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶 Taq DNA聚合酶 引物 一小段RNA 可以是RNA或单链DNA分子片段 合成子链 在引物基础上，一条链连续合成；另一条链不连续合成，再由DNA连接酶连接 分别从两条链的引物的3′端开始延伸，都是连续合成